可見分光光度計是根據(jù)物質(zhì)基態(tài)原子蒸汽對特征輻射吸收的作用來進行金屬元素分析的,它能夠靈敏可靠的測定微量或痕量元素。要是利用待測元素的共振輻射,通過其原子蒸汽,測定其吸光度的裝置稱為原子吸收分光光度計。元素在熱解石墨爐中被加熱原子化,成為基態(tài)原子蒸汽,對空心陰極燈發(fā)射的特征輻射進行選擇性吸收。在一定濃度范圍內(nèi),其吸收強度與試液中被測元素的含量成正比。其定量關(guān)系可用郎伯-比耳定律,A=-lgI/Io=-lgT=KCL,式中I為透射光強度;Io為發(fā)射光強度;T為透射比;L為光通過原子化器光程(長度),每臺儀器的L值是固定的;C是被測樣品濃度;所以A=KC。
可見分光光度計操作注意事項:
1、比色皿使用時注意不要沾污或?qū)⒈壬蟮耐腹饷婺p,應(yīng)手持比色皿的毛面。
2、待測液制備好后應(yīng)盡快測量,避免有色物質(zhì)分解,影響測量結(jié)果。
3、測得的吸光度A建議控制在0.2~0.8之間,超過1.0時要做適當稀釋。
4、開關(guān)試樣室蓋時動作要輕緩。
5、不要在儀器上方傾倒測試樣品,以免樣品污染儀器表面,損壞儀器。
6、比色皿在盛裝樣品前,應(yīng)用所盛裝樣品沖洗兩次,測量結(jié)束后比色皿應(yīng)用蒸餾水清洗干凈后倒置晾干。若比色皿內(nèi)有顏色掛壁,可用無水乙醇浸泡清洗。
7、向比色皿中加樣時,若樣品流到比色皿外壁時,應(yīng)以濾紙點干,鏡頭紙擦凈后測量,切忌用濾紙擦拭,以免比色皿出現(xiàn)劃痕。
8、測定紫外波長時,需選用石英比色皿。
9、測量過程中不可打開測量室的窗門,否則會影響測量結(jié)果的準確性。
可見分光光度計主要可應(yīng)用于科研、化工、醫(yī)藥、生化、環(huán)保以及臨床檢驗、食品檢驗、教學實驗等領(lǐng)域。通過儀器的參數(shù)測定, 不但可以做一般的定量分析, 而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構(gòu)象變化,從而闡明分子結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系。